Alpha-amylase variant with altered properties

  • US 20110136206A1
  • Filed: 02/03/2011
  • Published: 06/09/2011
  • Est. Priority Date: 05/15/2001
  • Status: Active Grant
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1. A variant of a parent Termamyl-like alpha-amylase, comprising one or more of the following substitutions:

  • X1A, R, N, D, C, Q, E, G, H, I, L, K, M, F, P, S, T, W, Y;

    X2R, N, D, C, Q, E, G, H, I, L, K, M, F, S, T, W, Y, V;

    X3A, R, N, D, C, Q, E, G, H, I, L, K, M, F, P, S, T, W, Y;

    X4A, R, N, D, C, Q, E, G, H, I, L, K, M, F, P, S, T, W, Y, V;

    X13R, N, D, C, Q, E, G, H, K, M, P, S, T, W;

    X14A, R, D, C, G, K, M, P, W;

    X16R, N, D, C, Q, E, G, H, I, L, K, M, F, S, T, W, Y, V;

    X17A, R, N, D, C, Q, E, G, H, I, L, K, M, F, P, S, T, W, Y, V;

    X18A, R, N, D, C, Q, E, G, H, I, L, K, M, F, P, S, T, W, Y, V;

    X20A, R, N, D, C, Q, E, G, H, I, L, K, M, F, P, S, T, W, Y, V;

    X23A, R, N, D, C, Q, E, G, H, I, L, M, F, P, S, W, Y, V;

    X24A, R, N, D, C, Q, E, G, H, I, L, K, M, F, P, S, T, W, Y, V;

    X26A, D, C, E, G, H, I, L, M, F, P, S, T, W, V;

    X34A, R, N, C, Q, E, G, H, I, L, K, M, F, P, T, W, Y, V;

    X35A, R, N, D, C, Q, E, G, H, K, M, F, P, S, T, W, Y, V;

    X49A, C, G, H, P, T;

    X50A, R, N, C, Q, E, G, H, K, M, F, P, S, W;

    X51A, N, D, C, Q, E, G, H, I, L, M, F, P, S, T, W, Y, V;

    X52A, R, D, C, Q, E, G, H, K, P;

    X53A, D, C, G, H, K, M, P;

    X61A, R, N, D, C, Q, E, G, H, I, L, K, M, P, S, T, Y;

    X62A, R, D, C, G, K, M, P, Y;

    X67A, R, N, D, C, Q, E, G, H, I, L, K, M, F, P, S, T, Y, V;

    X68A, R, D, C, E, G, H, I, L, K, M, F, P, S, T, W, Y, V;

    X73A, R, N, D, C, Q, E, G, H, K, M, P, S, T, W, Y, V;

    X84A, R, N, D, C, G, H, I, L, K, M, F, P, S, T, W, Y, V;

    X85A, R, N, C, E, G, H, I, L, K, M, F, P, S, T, W, Y, V;

    X88A, R, N, D, C, E, G, H, I, L, K, M, F, P, S, T, W, Y, V;

    X91A, R, N, D, C, Q, E, G, H, I, L, K, M, F, P, S, T, W, Y, V;

    X92A, R, N, D, C, Q, E, G, H, I, L, M, F, P, S, T, W, Y, V;

    X96A, R, N, D, C, E, G, H, I, L, K, M, F, P, S, T, W, Y, V;

    X106A, N, D, C, Q, E, G, H, I, L, K, M, P, S, T, Y, V;

    X108R, N, D, C, Q, E, G, H, I, L, K, M, F, P, S, T, W, Y, V;

    X114A, N, C, Q, E, G, H, K, F, P, S, T, W, Y;

    X116A, R, D, C, Q, E, G, H, I, L, M, F, P, S, W, Y, V;

    X119A, R, N, D, Q, E, G, H, I, L, K, M, F, P, S, T, W, Y, V;

    X121A, R, D, C, Q, E, G, H, I, L, K, M, F, P, S, T, W, Y, V;

    X122R, N, Q, G, H, I, L, M, F, S, T, W, Y, V;

    X123N, D, C, Q, E, G, H, I, L, M, F, P, S, T, W, Y, V;

    X124N, Q, G, H, I, L, M, F, P, S, T, W, Y, V;

    X125R, N, Q, E, G, I, K, M, F, S, T, W, Y;

    X126N, Q, G, H, I, L, M, F, P, S, T, W, Y, V;

    X127A, R, N, D, E, G, H, I, L, K, M, F, P, S, T, W, Y, V;

    X128A, R, N, D, C, Q, G, H, I, L, K, M, F, P, S, W, Y, V;

    X129A, R, N, D, C, Q, E, G, H, I, L, K, M, F, P, S, W, Y, V;

    X130A, R, N, D, Q, E, G, H, I, L, K, M, F, P, S, W, Y, V;

    X131A, R, N, D, C, Q, G, H, I, L, K, M, F, P, S, T, W, Y, V;

    X132R, N, D, C, Q, E, G, H, I, L, K, M, F, S, W, Y;

    X133R, N, D, C, M, T, W, V;

    X134A, N, D, C, E, G, H, I, L, K, M, F, P, S, T, W, Y, V;

    X136A, R, N, D, C, E, G, H, I, L, K, M, F, P, S, T, W, Y, V;

    X138R, N, D, Q, E, G, I, K, M, P, S, T, W, V;

    X145A, R, N, D, C, Q, E, G, H, I, L, K, M, P, S, T, Y, V;

    X147A, R, N, D, C, Q, E, G, H, I, L, K, M, P, S, T, W, Y, V;

    X148A, R, D, C, Q, E, G, H, I, L, K, M, F, P, T, W, Y, V;

    X149A, R, N, D, C, Q, E, G, H, L, K, M, F, P, S, T, W, Y, V;

    X150A, D, C, G, M, P, W, Y;

    X152A, R, N, C, Q, E, G, H, I, L, K, M, F, P, T, W, Y, V;

    X153A, R, N, D, C, Q, E, G, H, I, L, K, M, F, P, S, T, W, Y, V;

    X154A, R, N, D, C, Q, E, G, H, I, L, K, M, F, P, S, T, W, Y, V;

    X155A, R, N, D, C, Q, E, G, H, I, L, K, M, F, P, S, T, W, Y, V;

    X156A, C, Q, E, G, I, L, M, F, P, S, T, W, V;

    X157R, I, L, M, F, P, S, T, W, Y, V;

    X158R, M, P, W, Y;

    X164R, I, L, M, F, P, S, T, W, Y, V;

    X165A, N, D, C, Q, E, H, I, L, K, M, F, P, S, T, W, Y, V;

    X167A, R, N, D, C, Q, G, H, I, L, K, M, F, P, S, T, W, Y, V;

    X168A, R, N, D, C, Q, E, G, H, I, L, K, M, F, S, T, W, V;

    X169A, R, N, D, C, Q, E, G, H, M, P, S, W, Y, V;

    X170A, R, N, D, C, E, G, H, I, L, K, M, F, P, S, T, W, Y, V;

    X171A, R, N, D, C, Q, E, G, H, K, M, P, S, T, W, Y, V;

    X172A, N, D, C, Q, E, G, I, L, M, F, P, T, W, Y, V;

    X173A, N, D, C, Q, E, G, H, M, P, S, W, Y, V;

    X176A, N, D, C, Q, E, G, H, I, L, K, M, F, P, S, T, W, Y, V;

    X179D, C, Q, E, H, I, L, K, M, F, P, W, Y, V;

    X180A, G, I, L, M, F, P, W, Y, V;

    X181G;

    X182A, R, N, D, C, Q, E, G, H, I, L, K, M, F, P, S, T, W, Y, V;

    X184I, L, M, F, P, W, Y, V;

    X185R, I, L, M, F, P, S, T, W, Y, V;

    X188A, R, N, Q, G, H, L, M, F, W, V;

    X189A, R, N, G, H, I, L, M, F, P, S, T, W, Y, V;

    X190N;

    X191A, R, N, Q, G, H, I, L, M, F, P, S, T, W, Y, V;

    X193A, R, G, M, P, W, Y;

    X196A, N, Q, G, H, I, L, M, P, S, T, W, V;

    X198A, R, G, M, P, W;

    X204R, L, M, F, P, T, W, Y, V;

    X205A, G, H, I, L, M, F, P, W, Y, V;

    X206R, N, D, C, Q, E, G, H, I, L, K, M, F, P, S, T, W, Y, V;

    X209R, P, S, W, Y;

    X210A, R, N, D, C, Q, E, G, H, I, L, K, M, F, P, W, Y, V;

    X211E;

    X214A, D, C, Q, E, G, I, L, M, F, P, S, T, Y, V;

    X217A, R, N, D, C, Q, G, H, I, L, M, F, P, S, T, W, Y;

    X218A, R, N, D, C, Q, E, G, H, I, L, K, M, F, P, S, T, W, Y, V;

    X221A, R, D, C, Q, E, G, H, I, L, K, M, F, P, S, T, W, Y, V;

    X222A, R, N, D, C, E, G, H, I, L, K, M, F, P, S, W, Y, V;

    X234A, D, C, G, H, I, K, M, F, P, S, T, W, Y, V;

    X235A, R, N, D, C, Q, E, G, H, I, L, K, M, F, P, S, T, W, Y, V;

    X237A, G, H, I, L, M, F, W, Y, V;

    X239G, H, I, L, M, F, P, S, T, Y, V;

    X242G, I, L, M, F, S, T, W, Y, V;

    X246A, R, N, D, C, Q, E, G, H, I, L, K, M, F, P, S, T, W, Y, V;

    X247R, N, D, C, Q, E, G, H, I, L, K, M, F, P, S, T, W, V;

    X249A, R, N, D, C, Q, E, G, H, I, L, K, M, F, P, S, T, W, Y, V;

    X250A, R, N, D, C, E, H, I, L, K, M, P, T, W, Y, V;

    X251R, N, D, C, E, G, H, I, L, K, M, F, P, S, T, W, Y, V;

    X252A, R, N, D, C, Q, E, G, H, I, L, K, M, F, P, S, W, Y, V;

    X253R, D, C, Q, E, H, I, L, K, M, F, P, S, T, W, Y;

    X254A, R, N, D, C, Q, E, G, H, I, L, M, F, P, S, T, W, Y, V;

    X255A, R, D, C, G, H, I, L, K, M, F, S, T, W, Y, V;

    X257A, R, N, D, C, Q, E, G, H, I, L, K, M, F, P, S, T, W, Y, V;

    X261A, R, N, D, C, Q, E, G, H, I, L, K, M, F, P, S, T, W, Y, V;

    X263A, R, N, D, C, Q, E, G, I, L, K, M, F, P, S, T, W, Y, V;

    X265C, Q, E, H, I, L, M, F, P, W;

    X266A, R, N, D, C, Q, E, G, H, I, L, K, M, F, P, S, T, W, Y, V;

    X267A, R, N, D, C, Q, E, G, H, K, P, S, T, W, Y, V;

    X268A, R, N, D, C, Q, E, G, H, I, L, K, M, F, P, S, T, W, Y, V;

    X269A, N, C, Q, G, H, I, L, M, F, P, S, T, W, Y, V;

    X271A, R, N, D, C, Q, E, G, H, I, L, K, M, F, P, S, T, W, Y, V;

    X272A, R, N, D, C, Q, E, G, H, I, L, K, M, F, P, S, T, W, Y, V;

    X275A, R, D, C, Q, E, G, H, I, L, K, M, F, P, S, W, Y, V;

    X276A, R, N, D, C, Q, E, G, H, I, L, M, F, P, S, T, W, Y, V;

    X278A, R, N, D, C, Q, E, G, H, I, L, K, M, F, P, S, T, W, Y, V;

    X280A, R, D, C, E, G, H, I, L, K, M, F, P, W, Y, V;

    X290W, Y;

    X291A, R, N, Q, G, H, I, L, M, F, P, S, T, W, Y, V;

    X293A, R, N, G, I, L, M, P, S, T, W, V;

    X294R, N, Q, G, H, I, L, M, F, P, S, T, W, Y;

    X297A, G, H, I, L, M, F, P, W, Y, V;

    X298G, H, I, L, M, F, P, S, T, W, Y, V;

    X299A, G, H, M, P, S, T;

    X300A, C, G, H, I, L, M, F, P, T, W, Y, V;

    X301N, Q, H, I, L, M, F, P, S, T, W, Y, V;

    X302R, M, P, W, Y;

    X303R, I, L, M, F, P, S, T, W, Y, V;

    X305G, I, L, M, F, P, S, T, W, Y, V;

    X306Q, G, H, I, L, M, F, P, S, T, W, Y, V;

    X308A, R, N, D, C, Q, E, G, H, I, L, K, M, F, P, S, T, W, Y, V;

    X309N, Q, G, H, I, L, M, F, P, S, T, W, Y, V;

    X310A, R, N, C, Q, E, H, I, L, K, M, F, P, S, T, W, Y, V;

    X314A, D, C, E, G, I, L, M, F, P, W, Y, V;

    X315A, N, C, Q, E, G, H, I, L, M, F, P, S, T, W, Y, V;

    X316A, R, N, D, C, Q, E, G, H, I, L, K, M, F, P, S, T, W, V;

    X317R, N, D, C, Q, E, G, H, I, L, K, M, F, P, S, T, W, Y, V;

    X318A, R, N, D, C, Q, E, G, H, I, K, P, S, W, Y, V;

    X319A, R, N, D, C, Q, E, G, H, I, L, M, F, P, S, T, W, Y, V;

    X328A, R, N, D, C, Q, E, G, H, I, L, K, M, F, P, S, T, W, Y, V;

    X332A, R, N, C, Q, E, G, H, I, L, K, M, F, P, S, T, W, Y, V;

    X333A, N, D, C, G, I, M, F, P, S, T, Y, V;

    X334R, N, C, Q, E, G, H, K, M, F, P, S, W, Y;

    X335R, D, C, Q, E, H, I, L, K, M, F, P, W, Y, V;

    X336A, N, D, C, Q, E, G, H, I, L, M, F, P, S, T, W, Y, V;

    X337A, R, N, C, Q, E, G, H, I, L, M, F, P, S, T, W, Y, V;

    X338A, R, N, C, Q, G, H, I, L, K, M, F, P, S, T, W, Y, V;

    X340I, L, M, F, P, S, T, W, Y, V;

    X341A, R, D, C, G, H, I, L, K, M, F, W, Y, V;

    X342R, I, L, M, F, P, S, T, W, Y, V;

    X345R, N, D, C, Q, E, G, H, I, L, K, M, F, P, T, W, Y, V;

    X355A, R, N, D, C, Q, G, H, I, L, K, M, F, P, S, T, W, Y, V;

    X358A, R, D, C, G, K, M, P, W, Y;

    X363A, R, D, C, G, K, M, P, W, Y;

    X370A, R, N, D, C, Q, E, G, H, I, L, K, M, F, P, S, T, W, Y, V;

    X371A, N, C, Q, E, G, H, I, L, K, M, F, P, S, T, W, Y, V;

    X373A, R, N, D, C, Q, E, G, H, I, L, K, M, F, S, T, W, Y, V;

    X374A, N, D, C, Q, E, G, H, I, L, K, M, F, S, T, W, Y, V;

    X375A, R, N, D, C, Q, G, H, I, L, K, M, F, P, S, T, W, V;

    X376A, R, N, D, C, Q, E, G, H, I, L, M, F, P, S, T, W, Y, V;

    X378R, N, D, C, Q, E, G, H, I, L, K, M, F, S, T, W, Y, V;

    X379A, R, N, D, C, Q, E, G, H, I, L, K, M, F, P, T, W, Y, V;

    X381A, R, N, D, C, Q, E, G, H, I, L, K, M, F, P, S, T, W, Y, V;

    X389A, D, C, G, H, M, F, P, S, T, W, Y, V;

    X393A, N, C, Q, E, G, H, I, L, K, M, F, P, S, T, W, Y, V;

    X394A, R, D, C, G, K, M, P, W, Y;

    X396A, R, D, C, G, K, M, P, W, Y;

    X398A, R, N, D, C, Q, E, G, H, I, L, M, F, W, Y, V;

    X402R, C, G, K, M, P, W, Y;

    X403A, R, N, Q, G, H, I, L, M, F, P, S, T, W, Y, V;

    X404R, I, L, M, F, P, S, T, W, Y, V;

    X405R, G, H, I, L, M, F, P, W, Y, V;

    X406A, R, G, H, I, M, F, P, Y, V;

    X407A, R, Q, G, H, I, L, M, F, P, S, T, W, Y, V;

    X408A, R, N, D, C, Q, E, G, H, I, K, M, P, S, T, W, Y, V;

    X413A, R, N, D, C, Q, E, G, H, I, L, K, M, F, P, S, T, W, Y, V;

    X414A, R, N, D, C, Q, E, G, H, I, L, K, M, F, P, S, T, W, Y, V;

    X415A, R, N, D, C, Q, E, G, H, I, L, K, M, F, P, S, T, W, Y, V;

    X416A, R, N, D, C, Q, E, G, H, I, L, K, M, F, P, S, T, W, Y, V;

    X417A, R, N, D, C, Q, E, G, H, I, L, K, M, F, P, S, W, Y, V;

    X418A, R, N, D, C, Q, E, G, H, I, L, K, M, F, P, S, T, W, Y, V;

    X419A, R, N, D, C, Q, E, G, H, I, L, M, F, P, S, T, W, Y, V;

    X420A, N, D, C, E, G, H, I, L, K, M, F, S, T, W, Y, V;

    X421A, R, N, D, C, Q, E, H, I, L, K, M, F, P, S, T, W, Y, V;

    X422A, R, N, D, C, Q, E, G, H, I, L, K, M, F, P, S, T, W, Y, V;

    X431A, R, N, Q, G, H, I, L, M, F, P, S, T, W, Y, V;

    X432G, H, I, L, M, F, P, S, T, W, Y, V;

    X433A, R, N, Q, G, H, I, L, M, F, P, S, T, W, Y, V;

    X434A, R, N, Q, G, H, I, L, M, F, P, S, T, W, Y, V;

    X435Q, G, H, I, L, M, F, P, T, W, Y, V;

    X436A, R, N, D, C, Q, E, G, H, I, L, K, M, F, P, S, T, W, Y, V;

    X437A, N, D, C, Q, E, G, H, I, L, K, M, F, P, S, T, W, Y, V;

    X439A, R, D, C, G, K, M, P, W, Y;

    X442A, R, N, D, C, E, G, H, I, L, M, F, P, S, T, W, Y, V;

    X443A, R, N, D, C, E, G, H, I, L, M, F, P, S, T, W, Y, V;

    X444A, C, G, H, I, L, M, F, P, S, T, W, Y, V;

    X445A, R, N, D, C, Q, E, G, H, I, L, K, M, F, P, S, T, W, Y, V;

    X446A, R, N, D, C, Q, E, G, H, I, L, K, M, F, P, S, T, W, Y, V;

    X447A, N, D, C, G, H, I, L, M, F, P, S, T, W, Y, V;

    X448A, R, N, D, C, Q, E, G, H, I, L, K, M, F, P, S, T, W, Y, V;

    X450A, N, D, C, Q, E, G, I, L, K, M, F, P, S, T, W, V;

    X454A, R, N, D, C, Q, E, G, H, I, L, K, M, F, P, S, T, W, Y, V;

    X455A, R, N, C, Q, G, H, I, L, K, M, F, P, S, T, W, Y, V;

    X456A, D, C, E, G, H, I, L, M, F, P, S, T, W, Y, V;

    X457A, R, N, D, C, Q, E, G, H, I, L, K, M, F, W, Y, V;

    X458A, R, N, C, Q, E, G, H, I, L, K, M, F, P, S, T, W, Y, V;

    X459R, N, D, C, Q, E, G, H, I, L, K, M, F, S, W, Y, V;

    X460A, R, N, D, C, Q, E, G, H, I, L, K, M, F, P, S, T, W, Y, V;

    X461A, R, N, D, C, Q, E, G, H, I, L, M, F, P, S, W, Y, V;

    X463A, R, N, D, C, Q, E, H, I, L, K, M, F, P, S, T, W, Y, V;

    X464A, R, N, D, C, Q, E, G, H, I, L, K, M, F, P, S, T, W, Y, V;

    X465A, R, N, C, Q, E, G, H, I, L, K, M, F, P, S, T, W, Y, V;

    X467A, R, N, D, C, Q, E, G, H, I, L, K, M, F, P, S, T, W, Y, V;

    X469A, R, N, D, C, Q, G, H, I, L, K, M, F, P, S, T, W, Y, V;

    X473N, Q, G, H, I, L, M, F, P, S, T, W, Y, V;

    X474A, R, G, H, I, L, M, F, P, W, Y, V;

    X475A, N, Q, G, H, I, L, M, F, P, S, T, W, Y, V;

    X476G, H, I, L, M, F, P, S, T, W, Y, V;

    X482A, N, D, C, G, H, I, L, M, F, S, T, W, Y, V;

    X483A, N, D, C, Q, E, G, H, I, L, M, F, P, S, T, W, Y, Vwherein(a) the variant has alpha-amylase activity and (b) each position corresponds to a position of the amino acid sequence of the parent Termamyl-like alpha-amylase having the amino acid sequence shown in SEQ ID NO;

    8 (Bacillus licheniformis alph-amylase).

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